DNA提取纯化流程
你知道DNA提取纯化流程有哪些吗？让我们一起来看看吧！
一、样本采集与保存
1.新鲜：新鲜样本中受到内源性核酸酶影响相对最小，得到DNA质量相对更好。
2.适量：投入过多样本，后续样本裂解不充分从而影响DNA提取情况，还会引入过多杂质及内源性核酸酶。
3.不同类型的样本在采集与保存时也会存在差异
4.植物组织保存时间：对于含有多糖多酚等次生代谢产物的衰老叶片可在4℃黑暗环境下饥饿1-2天；进行低温或冷冻保存可以避免内源性DNA酶对样本中的DNA进行一个降解。
5.动物组织保存时间：-20℃短期保存（1-3个月），-70℃长期保存；福尔马林固定时间8-24h内为宜，样本存放时间不宜超过1年；FFPE样本保存温度4℃，建议不超过3年。
二、样本处理方式
1.动物组织：液氮研磨或匀浆。
2.植物组织：液氮研磨（最推荐），研磨充分又保证样本处于低温条件下避免DNA降解。
3.哺乳动物血液样本：DNA存在于含有细胞核的白细胞中，而大量存在的红细胞会引入更多杂质和核酸酶，所以需要提前使用红细胞裂解液对红细胞进行去除。
4.细胞样本：贴壁细胞胰酶消化处理再做收集，悬浮细胞只要离心弃上清。
5.细菌样本：溶菌酶破壁处理，如金黄色葡萄球菌加入一定量的溶菌酶在37℃条件下孵育30min就可完成破壁的处理。
6.真菌样本：酶解破壁或液氮冻融或超声裂解法。
7.FFPE样本：脱蜡处理（二甲苯或矿物油类的物质进行脱蜡处理）。
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更新时间：2023-11-21
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